MF熒光倒置顯微鏡的調(diào)整主要有哪些內(nèi)容?
為了使
MF熒光倒置顯微鏡的視野能受到均勻而又充分的照明,在顯微鏡初次安裝和調(diào)試時(shí),就必須把照明光路系統(tǒng)調(diào)整好,這是正確使用顯微鏡,并獲得正確、可靠結(jié)果的重要手段和基本的要求。
此外,正確掌握照明光路系統(tǒng)的調(diào)整,是使用過(guò)程中更換光源燈泡后所必經(jīng)的步驟,也是在日常使用過(guò)程中不時(shí)地檢驗(yàn)顯微鏡性能的必要手段。顯微鏡照明光路系統(tǒng)的調(diào)整主要有以下內(nèi)容:
(1) 照明光源燈室在顯微外的初步調(diào)整
① 首先將燈室的外殼打開(kāi),壓彈簧夾子將鹵素?zé)襞菅b入插座中,安裝時(shí)避免手指直接接觸燈泡(可用柔軟的布或紙隔?。?,以免燈泡上留有指紋等臟物,影響燈泡的使用壽命。
② 把燈室擺在桌面上,接通電源后,用的螺絲刀調(diào)節(jié)燈的調(diào)焦旋鈕孔(標(biāo)有“←→”),使燈絲投影在1-2m外的墻上,將燈絲成像調(diào)至清晰;然后調(diào)節(jié)燈的高低位置調(diào)節(jié)絲孔(標(biāo)有“──”),使MF熒光倒置顯微鏡燈絲位置高 低適當(dāng);再調(diào)節(jié)燈的左右位置調(diào)節(jié)螺絲孔(標(biāo)有“──”),使燈絲左右位置合適。
(2) 光源發(fā)光體(燈絲)在顯微鏡內(nèi)位置的檢驗(yàn)和校正目的是為了把發(fā)光體的像端端正正地調(diào)入物鏡的視域范圍內(nèi),從光源的角度去確保的視域受到充分而均勻的照明,這是調(diào)整庫(kù)勒照明系統(tǒng)的前提條件,需要的 基本工具:對(duì)中望遠(yuǎn)鏡購(gòu)置顯微鏡時(shí)已配備。
MF熒光倒置顯微鏡觀察標(biāo)本制作要求
1、載玻片。載玻片厚度應(yīng)在0.8~1.2mm之間,太厚的載玻片,一方面光吸收多,另一方面不能使激發(fā)光在標(biāo)本上聚集。載玻片必須光潔,厚度均勻,無(wú)明顯自發(fā)熒光,有時(shí)需用石英玻璃作為載玻片。
2、蓋玻片。蓋玻片厚度在0.17mm左右,光潔。為了加強(qiáng)激發(fā)光,也可用干澀蓋玻片,這是一種特制的表面鍍有若干層對(duì)不同波長(zhǎng)的光起不同干涉作用的物質(zhì)(如氟化鎂)的蓋玻片,它可以使熒光順利通過(guò),而反射 激發(fā)光,這種反射的激發(fā)光可激發(fā)標(biāo)本。
3、標(biāo)本。組織切片或其他標(biāo)本不能太厚,如太厚激發(fā)光大部分消耗在標(biāo)本下部,而物鏡直接觀察到的上部不能被充分激發(fā)。另外,細(xì)胞重疊或雜質(zhì)掩蓋,影響判斷。
4、封裱劑。封裱劑常用甘油,必須無(wú)自發(fā)熒光,無(wú)色透明,熒光的亮度在PH8.5~9.5時(shí)較亮,不易很快褪去。所以,常用甘油和0.5mol/L PH9.0~9.5的碳酸鹽緩沖液的等量混合液作封裱劑。
5、鏡油。一般用MF熒光倒置顯微鏡和油鏡觀察標(biāo)本時(shí),必須使用鏡油。好使用特制的無(wú)熒光鏡油,也可用上述甘油代替,液體石蠟也可用,只是折光率較低,對(duì)圖像質(zhì)量略有影響。